T4核糖核酸聚合酶(E. coli

——T4 Ribonucleic acid polymerase

制备方法

 

[分子量] 约500000(亚基α40000; β和β’各约160000,σ90000)

EC 2. 7. 7. 6

 

[别名] Nucleoside triphosphate; RNA nucleotidyltransferase

 

[单位定义] 1单位在pH7.9, 37℃,10分钟参入1.0mμmol的AMP成为酸可沉淀的产物。

 

[性状] 此酶有4个核亚基,α2,β,β’和σ。

专一性为单股或双股脱氧核糖核酸,多聚脱氧核苷酸。激活剂为二价离子如Mg2+,Mn2+和Co2+。抑制剂为多聚阴离子,利福平,曲张链菌素,链霉溶菌素和巯基试剂。

A2801%=6.5

 

[贮存] 准备贮藏的酶用1。5倍体积的饱和硫酸铵沉淀。沉淀溶于保藏缓冲液(0.01mol/L Tris(pH7.9), 0.01mol/L氯化镁,0.1mol/L氯化钾,0.1mmol/L二巯基苏糖醇(DTT),0.1mmol/L EDTA和50%甘油)中,使最后浓度为5mg/mL或更浓。此溶液在-20℃保藏时不结冻,至少能稳定6个月。