T4-DNA连接酶

——T4-DNA ligase (E. coli NM989)

制备方法

[分子量] 68000

EC 6. 5. 1. 1

[别名] Poly(deoxyribonucleotide): poly(deoxyribonucleotide) ligase [AMP forming]; Deoxyribonucleic acid ligase

[酶反应] 1）磷酸二酯键切口的修复通过胰DNA酶引入至双螺旋DNA的链；2）λ噬菌体DNA的H-键圆复式或多联体转化成共价的圆分子或多联体。

[单位定义] 在37℃, pH7.6, 20分钟能催化1mμmol的³²P-磷酸单酯转化成磷酸酯-抗性形式的酶量为1单位。

[性状] 在66mmol/L Tris-HCl缓冲液中，最适pH7.2-7.8。在pH6.9和8.0时，酶的活力分别只有在7.6时的46%和65%。

激活剂有Mg²⁺，Mn²⁺（只及Mg²⁺的1/4）；SH（如DTT和β-巯基乙醇）；ATP是必须的。