核糖核酸酶U2

——Ribonuclease U2 (Ustilago sphaerogena)

制备方法

 

[分子量] 10000

EC 3. 1. 27. 4

 

[别名] Puryloribonuclease

 

[酶反应] 核糖核酸酶U2分裂核糖核酸链在嘌呤部位,形成中间体2’,3’-环磷酸,再形成3’-嘌呤核苷酸。

 

[单位定义] 在pH4.5,37℃, 1.0mL反应溶积中,15分钟产生酸溶性的寡核苷酸相当于A260nm光密度增加1.0的酶量为1单位。底物为酵母核糖核酸。

 

[性状] 核糖核酸酶U2是一酸性蛋白。制剂中应不含5’-核苷酸酶和磷酸二酯酶。它的磷酸转移酶活力较水解酶活力大。此酶制剂的比活力约为1.4×103单位/O.D.280单位,相当于约1/5核糖核酸酶T1和2倍核糖核酸酶T2。

稳定性:核糖核酸酶U2和核糖核酸T1一样稳定。在磷酸钠缓冲液(pH6.9)中加热80℃4分钟,完全能经受。

它消化核糖核酸的最适pH是4.5。最大吸收值在277.5nm,最小吸收值在251nm。A277.5/A251=2.6。

 

[用途] 它不仅是一有用工具用于核糖核酸的核苷酸顺序分析,而且也可用于含腺苷酸和鸟苷残基的寡聚核苷酸的合成。