核酸酶P1(桔青霉)
——Nuclease P1(Penicillium citrinum)
[分子量] 约42000-50000;44000(沉降平衡法,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法)。
EC 3. 1. 30. 1
[酶反应] 核酸酶P1裂解RNA和DNA中的3’----5’磷酸二酯键和单核苷酸和寡核苷酸中的3’-磷酸单酯键,没有碱基专一性。
[单位定义] 用RNA测3’----5’-磷酸二酯酶:在37℃,pH5.3,1分钟释放1.0μmol的酸溶性核苷酸的酶量为1单位。
用3’-MP测3’-核苷酸酶:在37℃,pH5.3,1分钟水解1.0μmol正磷酸的酶量为1单位。
[性状] 此酶是一个糖蛋白。由蛋白质和糖两部分组成。蛋白质约占81%,糖约占17.4%(甘露糖二半乳糖:氨基葡萄糖6.2: 1分子比)。此酶是没有亚基组成的。蛋白质的氨基酸组成分析,其中有25%氨基酸残基具有可解离的基团,有21%的氨基酸残基具有亲水性基团,有54%的氨基酸残基具有疏水性基团。含有如此多的疏水氨基酸,特别是酪氨基和色氨酸残基,是这个酶的重要特性,大量的疏水氨基酸使酶形成了紧密的结构,可能是此酶高度稳定原因之一。此酶对蛋白变性剂尿素和盐酸胍表现得非常稳定,对热也相稳定。此酶是一个含锌的金属酶,每个酶原子含有三个锌原子。锌对酶活及酶稳定性极为重要。
pI=4.5
[贮存] 干燥4℃保存